Методы исследования
Расчет проводят по формуле:
Х=0,1*(Ек-Ео)/Ек,
где Х-количество SH-групп (в мкмоль)
,1-количество йода, вносимого в пробу (в мкэкв)
Ек и Ео-экстинции соответственно контрольной и опытной проб
Определение SH-небелковых соединений
К 0,1 мл супернатанта (полученного из гомогената с добавлением 7% ТХУ в соотношении 1:1, после центрифугирования в течение 5 мин при 3000 об/мин) добавляют 2 мл 3М KI, 0,1 мл 5% раствора крахмала и 3 мл фосфатного буфера рН=7,6. Пробу перемешивают и в кювете с длинной оптического пути 10мм помещают в ФЭК против контрольной пробы. Стрелку гальванометра и шкалу экстинций устанавливают на нуле. Затем в пробу вносят 0,1 мл 0,001н раствора I2, тщательно перемешивают и колориметрируют через 10сек после внесения йода в пробу. Длина волны 490 нм.
Содержание SH-групп белков определяют по разнице концентраций общих и небелковых SH-групп.
Статистическая обработка результатов
Проверка нормальности распределения оценивалась по критерию Шапиро-Уилка. Учитывая нормальное распределение данных, для каждой группы рассчитывались средние значения и стандартные отклонения. Для оценки достоверности различий между группами использовался t-тест Стьюдента для независимых переменных [1].