Экспериментальная часть
Цветами отмечены: … - промотор Т7 РНК-полимеразы; …- сайт рестрикции эндонуклеазы HindIII; … - сайт рестрикции эндонуклеазы BamHI.
Образцы крови для выделения поликлональных аутоантител были взяты у больных, состоящих в областной общественной организации больных рассеянным склерозом г. Новосибирска, и у больных, состоящих на учете при кафедре неврологии и нейрохирургии НГМУ. Поликлональные аутоантитела класса G были выделены из 10 образцов сыворотки крови больных рассеянным склерозом, хроматографически разделены на фракции по сродству к основному белку миелина и иммобилизованы на BrCN-активированной сефарозе (Sigma-Aldrich, США) согласно протоколу (Pharmacia, Швеция) в Лаборатории ферментов репарации ИХБФМ СО РАН Безугловой А.М. Пул поликлональных аутоантител хранили в 50 мМ Tрис-HCl, pH 7.5 при -20°С.
Для клонирования обогащенной 2'-F-модифицированной РНК-библиотеки использовали клетки E.coli штамма DH5α, любезно предоставленные д.б.н. Жарковым Д.О. (ИХБФМ СО РАН), и вектор pUC18 (Fermentas, Литва).