Методы выявления и подтверждения диагноза туберкулеза
При положительных данных бактериоскопическогоисследования рост МБТ обнаруживали радиометрически на 7-10-й день и на 14-21-й дни при отрицательных данных.
К недостаткам этого метода, ограничивающим возможность его широкого применения, относятся:
· высокая себестоимость исследования;
· необходимость применения радиоактивных изотопов и специального радиометрического оборудования, сложность работы с изотопной технологией;
· необходимость дополнительного посева на плотную питательную среду при возникновении проблем с идентификацией или интерпретацией результатов (Бардисявичене, Сосновская, 1996).
туберкулез возбудитель заражение лекарственный
Методы исследования лекарственной чувствительности микобактерий
Для определения лекарственной чувствительности (ЛЧ) МБТ должны использоваться только стандартизованные методы исследования, что позволяет:
· правильно вести лечение пациентов;
· интерпретировать и сравнивать данные, полученные из различных источников;
· проводить оценку уровней лекарственной устойчивости и тенденций, наблюдаемых в разных регионах или странах.
В настоящее время нет единого универсального метода определения ЛЧ МБТ. Имеются культуральные методы с использованием плотных и жидких питательных сред, с полуавтоматической и автоматической детекцией роста микобактерий, а также молекулярно-генетические экспрессные методы.
Все имеющиеся методы определения ЛЧ МБТ можно условно разделить на 2 категории:
· методы прямого определения ЛЧ МБТ;
· методы непрямого определения ЛЧ МБТ.
При использовании методов прямого определения ЛЧ МБТмокрота или другие клинические материалы, предварительно обеззараженные и прошедшие гомогенизацию, высеваются непосредственно на среды, содержащие и не содержащие соответствующий препарат. Количество инокулята определяется в зависимости от количества КУМ, определенного при микроскопии мазка.
Методы прямого определения ЛЧ имеют ряд недостатков:
) для исследования нельзя использовать образцы диагностического материала, имеющие отрицательный результат микроскопии;
) при проведении данного исследования повышается риск контаминации;
) может наблюдаться недостаточный рост культуры, не позволяющий сделать достоверные выводы.
При использовании методов непрямого определения ЛЧ МБТпроводится выделение микроорганизмов из клинических образцов при культивировании, а затем на контрольную и содержащую препарат яичную или плотную агаровую среду высевается гомогенная суспензия или культура, выросшая на бульоне.
В литературе описаны три основных классических микробиологических метода непрямого определения ЛЧ МБТ:
) Метод пропорций, предложенный в 1963 г. Canetti, RistandGrosset и детализированный в 1985 г. MiddlebrookandCohn;
) Метод коэффициента устойчивости, разработанный в 1961 г. Mitchison и др.
) Метод абсолютных концентраций на плотных и жидких средах, модифицированный в 1970 г. Meissener (Севастьянова, 2009).
В Беларуси наиболее распространенным и традиционно используемым методом определения ЛЧ МБТ является непрямой метод абсолютных концентраций на плотной яичной питательной среде Левенштейна-Йенсена. Остальные методы тестирования ЛЧ МБТ являются альтернативными.